Zakres zastosowania systemu separacji chromatografii ciekłej niskiego ciśnienia: badania naukowe i przygotowanie w biochemii, chemii syntetycznej, produktach naturalnych, rozwoju leków, chemii spożywczej, chemii rolnej, kosmetyków, polimerów i petrochemicznych. Może być przeprowadzona stratyfikacja wymiany jonowej, stratyfikacja afinity, stratyfikacja filtrowania żelu, stratyfikacja hydrofobów i inne metody, wykorzystywane do analizy separacji, wykrywania przepływu białek, enzymów, kwasów nukleotydów, polipeptydów, (zawierających / nie zawierających aminokwasów aromatycznych) i innych próbek biologicznych / niebiologicznych wchłanianych UV, jest idealnym wyborem do oczyszczania biomolekularnych, ma wiele funkcji, łatwe w użyciu, ekonomiczne i inne cechy. Kompaktowa konstrukcja zapewnia maksymalną oszczędność miejsca w magazynie chłodniczym i laboratorium.

Uwaga

Wymagania dotyczące wskaźników technicznych wysokiej wydajności detektora podwójnego promieniowania UV w konfiguracji systemu są stosowane do testowania ilościowego w fabrykach farmaceutycznych w całym kraju. Charakterystyka sprzętu

Rozmiar długości fali białka 280nm/254nm

Białko zawiera aminokwasy aromatyczne, takie jak tyrozyna i triana. Mają właściwość wchłaniania światła ultrafioletowego, jego szczyt wchłaniania znajduje się na długości fali 280nm, a wartość gęstości światła wchłaniania szczytu w tej długości fali jest prawidłowo proporcjonalna do jego stężenia, więc może służyć jako podstawa do jakościowego i ilościowego określenia białka, dlatego metoda wchłaniania ultrafioletowego na 280nm jest zwykle stosowana do ciągłego monitorowania stężenia białka w systemie stratologicznym. Ale ze względu na różne zawartości tyrozyny i trycyny w różnych białkach, aby dokładnie określić ilość, należy porównać czyste białko do zbadania jako kryterium lub już znać jego współczynnik osłabienia jako odniesienie. Ponadto wiele substancji niebiałkowych ma również określoną zdolność wchłaniania w długości fali 280nm, co może powodować zakłócenia. Szczególnie silniejszy jest wpływ kwasów nukleowych (puriny i pyrymyny). Absorpcja przy 280nm jest 10 razy silniejsza (na gram) niż białko, ale

Kwas nukleowy jest silniejszy w 254nm, a jego szczyt wchłaniania znajduje się w pobliżu 254nm. Współczynnik osłabienia kwasu nukleowego na 254nm jest dwukrotnie większy niż na 280nm, podczas gdy białko jest odwrotne, a absorpcja UV na 280nm jest większa niż wartość absorpcji na 254nm.

Zwykle

Współczynnik wchłaniania światła w czystym białku: A280/A254 1,8

Współczynnik pochłaniania światła czystego kwasu nuklearnego: A280/A254 0,5

W związku z tym, gdy kwas nukleowy jest obecny jednocześnie w roztworze białka (w większości układów biologicznych), należy mierzyć jednocześnie OD254nm i OD280nm. Następnie na podstawie stosunku wchłaniania dwóch długości fali, prawdziwa zawartość białka została obliczona za pomocą formuły empirycznej, aby wyeliminować wpływ kwasu nukleowego.

Stężenie białka: 1,45 x A280 – 0,74 x A254 (mg/ml)

Ta formuła empiryczna została ustalona na podstawie danych określonych przez szereg znanych różnych stosunków stężenia mieszaniny białka (enolazy drożdżowej) i kwasu nukleowego (kwas nukleowy drożdżowy).

Konfiguracja systemu